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如何避免胎牛血清使用時(shí)出現(xiàn)黑點(diǎn)
2021-06-27 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶(hù)由于操作方面而使黑點(diǎn)生成的辦法。對(duì)此一定要做好以下幾點(diǎn)。方可使細(xì)胞培養(yǎng)順利。（1）盡可能地減少血清凍融次數(shù)。（...
這樣做能防止胎牛血清產(chǎn)生沉淀
2021-05-30 沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失。如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：(1)解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍...
帶你了解細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的知識(shí)
2021-04-19 細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。形態(tài)學(xué)檢測(cè)是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的，起初，細(xì)胞間連接和微絨毛消失，細(xì)胞體積縮小，胞漿凝縮，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合，形成一個(gè)個(gè)空泡，核糖體與線(xiàn)粒體等細(xì)胞器聚集，結(jié)構(gòu)尚無(wú)明顯改變，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月?tīng)罡皆诤四ぶ苓?，?xì)胞核固縮呈均一的致密物，進(jìn)而斷裂成碎塊，此時(shí)細(xì)胞膜仍保持完整：然后，胞膜及核膜不斷出芽、脫落，一個(gè)細(xì)胞變成數(shù)個(gè)大小不等的有膜...
液體培養(yǎng)基接種要注意的事項(xiàng)有哪些
2021-02-24 液體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞，是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。在靜止的條件下，在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周?chē)纬赏高^(guò)養(yǎng)分的壁障，養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下，可消除這種阻礙以及增加供氧量，所以有利于細(xì)胞生長(zhǎng)，提高生產(chǎn)量。液體培養(yǎng)基接種要注意的事項(xiàng)有哪些：①用酒精棉消毒操作臺(tái)面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側(cè)，靠近酒精燈放置。將需要進(jìn)行液體轉(zhuǎn)接的試管插在試管架上，置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調(diào)至合適的刻度放于右手附近的架子上...
影響細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些
2021-02-22 細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等），使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過(guò)程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生...
選用牛血清白蛋白BSA需要考慮哪些問(wèn)題
2020-12-12 牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白，是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA，又稱(chēng)第五組分...
關(guān)于牛血清白蛋白BSA的知識(shí)你了解多少
2020-12-10 牛血清白蛋白BSA，又稱(chēng)第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blockingagent。它是牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自...
哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度？
2020-10-22 高保真DNA聚合酶的保真度是指準(zhǔn)確復(fù)制目的模板的結(jié)果。具體來(lái)說(shuō)，這涉及到多個(gè)步驟，包括讀取模板鏈，選擇正確的三磷酸核苷，并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區(qū)分正確和錯(cuò)誤的核苷酸，一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正”活性可切除不正確摻入的單核苷酸，并將其替換成正確的核苷酸。高保真PCR使用摻入錯(cuò)誤率低且具有校正活性的DNA聚合酶，以保證目的DNA的忠實(shí)復(fù)制。在設(shè)計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，你首先要考慮你的應(yīng)用是否需要高保真聚合酶。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果依賴(lài)于正確的DNA序...

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